- Effectuer les dépots des différents "sérums" avec la micropipette en prenant garde de bien changer les embouts entre chaque dépots (comme pour la méthode réelle).
- A l'aide d'un feutre permanent, annoter les boîtes afin de repérer l'emplacement des différents dépots.
Protocole :
- Placer la boîte de Pétri sur le gabarit puis percer les puits à l'aide de l'emporte-pièce.
Matériel :
- Boîtes de Pétri de 5-6 cm de diamètre contenant 4,5 mL de gélose (1g d'agar pour 120 mL d'eau distillée).
- Gabarits pour percer les puits.
- Emporte-pièce.
- Micropipette réglée sur 20 µL + embouts.
- Solution de NaOH à 1 mol.L-1 pour silmuler les anticorps ou les antigènes.
- Solution de ZnSO4 à 1 mol.L-1 pour simuler les anticorps ou les antigènes.
- Eau distillée pour simuler les antigènes ou les anticorps non spécifiques.
Principe :
Le test d'Ouchternlony est une méthode d'immunoprécipitation fondée sur la diffusion d'antigènes et d'anticorps en milieu solide. La rencontre d'un antigène avec un anticorps spécifique donne lieu à la précipitation de complexes immuns qui forme un arc blanchâtre visible à l'oeil nu.
Nous proposons ici une version alternative utilisant des produits de substitution, celle-ci étant beaucoup plus économique et permettant d'observer les résultats lors de la séance de TP.
